Диагноз дисбактериоза устанавливается на основании клинической картины, отсутствия эффекта или ухудшения состояния после применения антибиотиков. Для подтверждения диагноза дисбактериоза кишечника, помимо клинической картины, большое значение имеют данные лабораторных методов (бактериологических и серологических). При этом необходимо повторное обнаружение в посевах кала обильного роста условно-патогенных бактерий, таких как бактерий рода протея, стафилококков, дрожжеподобных грибов, лактозонегативных эшерихий и др.

Методика исследования кала на дисбактериоз. Исследуются испражнения больных (5-10 г), которые собирают в стерильные баночки. Консервант к испражнениям не добавляется. Для сбора испражнений используются горшки, судна и другая посуда, в которую кладется плотная стерильная бумага для защиты материала от возможных следов дезраствора. Собранный материал следует немедленно доставить в лабораторию и до посева хранить в холодильнике, но не более 4 ч. Особенно важно сбор материала проводить до начала антибактериального лечения.

Для выявления анаэробной микрофлоры рекомендуется разводить испражнения физиологическим раствором в 10 раз. Из этого основного разведения делают ряд последующих (1: 100, 1: 1000, 1: 10000, 1: 100000). Из последнего разведения делают посевы по 0,1 мл на среды Эндо, Левина, Сабуро, Плоскирева, кровяной агар и др. Количество кишечной палочки и других микробов в 1 г фекалий определяют по числу колоний, выросших на соответствующей питательной среде с пересчетом на количество посеянного материала и степень его разведения.

На 5% кровяном агаре учитывают процентные соотношения между колониями, обладающими и не обладающими гемолизирующими свойствами. Палочку протея легко обнаружить в посеве на агаре по Шукевичу (Н-форма) или среде Ресселя с мочевиной - окрашивание в фиолетово-коричневый цвет при индикаторе тимоловый синий с добавлением кислого фуксина. Чашки со средой Сабуро выдерживают в термостате в течение 3-5 дней, затем плотные колонии пересевают в среду с солодовым суслом и также помещают в термостат на 3-4 дня. При исследовании нативного препарата можно видеть длинные или короткие нити мицелия, характерные для патогенных дрожжеподобных грибов.

Для выявления анаэробных бифидобактерий необходимо делать посев на модифицированную среду Блаурококка. Посев фекалий делают в больших разведениях. На среду Блаурококка засевают 1 г фекалий в разведении от 10 6 до 10 11 . Посевы ставят в термостат при 37°С на 24 ч. Из посевов, в которых виден ст в виде помутнения всей среды или отдельных колоний, готовят мазки и Рашивают их по Граму. Обнаружение характерных грамположительных палочек с разветвлениями на концах в виде римской цифры V, с несколько утолнными концами подтверждает их принадлежность к бифидобактериям. Выделение чистой культуры бифидобактерий является очень трудоемким и не обязательным, так как определение разведения, в котором их обнаруживают является вполне достаточным для оценки нормального или пониженного содержания в фекалиях.

При описании кишечной микрофлоры обращают внимание на процентные соотношения следующих микроорганизмов:

лактозонегативных энтеробактерий по отношению к общему числу колоний, выросших на среде Эндо;

гемолизирующей кишечной палочки по отношению к общему числу колоний этого микроба на среде Эндо;

кокковых форм (стафилококков и энтерококков) по отношению ко всем выросшим на кровяном агаре колониям;

Это означает, например, что проводится колоноскопия или проверка пищевой аллергии. Диссбиоза не нуждается в дополнительном диагнозе в этом контексте, но, скорее всего, он основан на болезни. По этой причине терапевтические меры могут быть начаты без необходимости дополнительного анализа стула.

Как можно предотвратить и лечить дисбактериоз?

Ограничение использования антибиотиков

Как профилактика, так и лечение дисбактериоза направлены на улучшение положительных эффектов и ограничение вредного воздействия. Например, следует тщательно анализировать каждую дозу антибиотика. Однако, если есть сильное подозрение на бактериальную инфекцию, эти сильные агенты остаются существенными. Затем следует принять меры для обеспечения правильной дозы в течение установленного срока.

гемолизируюших кокковых форм к их общему числу на кровяном агаре.

Кроме этого, обязательно отмечается выделение протея, патогенного стафилококка, грибов Candida, синегнойной палочки и др.

Примеры ответов:

Выявлен незначительно выраженный дисбактериоз кишечника, характеризующийся преобладанием гемолитической кишечной палочки (35%) и наличием коагулазоположительного стафилококка.

Поскольку грудное вскармливание оказывает явное и долгосрочное положительное влияние на кишечную флору, младенец должен, по возможности, получать грудное молоко по крайней мере в первые четыре месяца жизни. У многих женщин проблемы с грудным вскармливанием в первые недели жизни новорожденного. Однако это не должно автоматически приводить к переходу на питание формулой; Хороший совет по грудному вскармливанию может помочь большинству матерей. Даже если возможно только частичное грудное вскармливание, поэтому ребенок также получает дополнительное сухое молоко, это оказывает защитное действие на кишечную флору и иммунную систему ребенка.

Выявлен резко выраженный дисбактериоз кишечника, характеризующийся значительным процентом лактозонегативных эшерихий (70%), гемолизирующего энтерококка (63%), наличием патогенного стафилококка и грибов Candida.

При генерализованном дисбактериозе, когда в патологический процесс вовлекаются кроме кишечника другие органы и системы, следует производить бактериологическое исследование не только фекалий, но также крови и мочи. Кроме традиционного бактериологического исследования показана также микроскопия фекального мазка.

В случае подозрения на кандидамикоз лабораторные исследования состоят из следующих этапов:

микроскопическое исследование испражнений и мочи;

изучение культуральных и биохимических свойств выделенных грибов;

постановка серологических реакций и аллергических проб - реакция связывания комплемента с убитой дрожжеподобной вакциной и полисахаридной фракцией из культуры Candida albicans.

Следует избегать раздувания пищевых продуктов, таких как капуста или бобовые. Если подозревается дисбактериоз, различные пребиотики и пробиотики могут быть использованы для восстановления баланса кишечной флоры. Пребиотики состоят из веществ, которые стимулируют рост «хороших» кишечных бактерий, тогда как пробиотики непосредственно содержат способствующие укреплению здоровья микроорганизмы. Например, квашеная капуста и йогурт полезны, но пробиотики также доступны в качестве пищевой добавки в аптеке.

Пересадка стула против дисбактериоза

Фекальное вещество диспенсера для стула заливается жидкостью и вводится пациенту через назогастральную трубку или во время колоноскопии в кишечнике. Теория состоит в том, что это позволит полезным бактериям оседать обратно в кишечник. Трансплантация не была одобрена для каких-либо других заболеваний, но есть эксперименты, которые будут проверять лечение болезни Крона или синдрома раздраженной толстой кишки.

Реакция связывания комплемента считается положительной при разведении сыворотки 1:10 и выше. Реакция агглютинации со взвесью живой культуры дрожжеподобного гриба. Эта реакция считается положительной при разведении сыворотки 1:200 и выше. Обнаружение при микроскопическом исследовании нитей псевдомицелия или почкующихся клеток, а также обильный рост колоний гриба Candida на среде Сабуро дает основание предполагать грибковый дисбактериоз.

Состав микрофлоры кишечника здорового человека представлено в таблице в колониеобразующих единицах (КОЕ) на 1 г фекалий.

У большинства больных при дисбактериозе кишечника возникают как количественные, так и качественные изменения нормальной микрофлоры. Дисбактериоз кишечника проявляется повышенным количеством кишечной палочки со слабо выраженными ферментативными свойствами (> 10%), появлением лактозонегативных энтеробактерий (> 5%), гемолизируюших эшерихий и др.

Весьма показательным признаком дисбактериоза также считают снижение способности микрофлоры инактивировать кишечные ферменты - энтерокиназу и щелочную фосфатазу. Обычно в фекалиях здорового человека они присутствуют в весьма незначительных количествах, а у больных с гастроэнтерологической патологией, особенно с заболеваниями кишечника с сопутствующим дисбактериозом, концентрация их резко возрастает.

Исследование индола, летучих фенолов, желчных и карбоновых кислот позволяет косвенно оценить биохимическую активность кишечной микрофлоры.

Дисбактериоз является динамичным процессом, в котором можно условно выделить отдельные этапы развития.

При преобладании в кишечнике бродильных процессов обращают на себя внимание резко кислый запах испражнений, значительное количество крахмальных зерен и переваренной клетчатки. Кал обычно жидкий с примесью пены, реакция кислая. При микроскопическом исследовании мазков кала, окрашенных раствором Люголя, выявляют большое количество клеток крахмала и обильную йодофильную флору.

Для гнилостной диспепсии характерен жидкий или кашицеобразный стул коричневого цвета со зловонным запахом. Кал имеет щелочную реакцию. При микроскопии в испражнениях обнаруживают остатки непереваренных мышечных волокон.

При копрологическом исследовании для слизистой колики типична примесь к испражнениям трубкообразной или лентообразной слизи, что обусловлено ее гиперсекрецией и спастическим состоянием толстой кишки. В слизи большое количество эозинофилов, кристаллов Шарко-Лейдена, в ряде случаев - много кристаллов кислого кальция фосфата.

Жидкие испражнения отражают гиперсекрецию в толстой кишке. При ложном поносе стул всегда водянистый или кашицеобразный, обычно с признаками бродильной диспепсии. Копрограмма при кишечном дисбактериозе нередко характеризуется повышенным содержанием лейкоцитов, часто одновременно с эритроцитами. Реакция на белок может быть положительной (определяется методом Гауфона).

Для запора типично исчезновение клетчатки или крахмала и вместе с тем отсутствие йодофильной флоры. При нарушениях пищеварения в илеоцекальном отделе кишки, обусловленных дисбактериозом, кал чаще не оформлен, золотисто-желтого цвета, запах кислый, реакция слабокислая. При копрологическом исследовании обнаруживается в большом количестве перевариваемая клетчатка и внутриклеточный крахмал, обильная йодофильная флора, в незначительном числе измененные мышечные волокна и расщепленный жир.

При дистальном колите кал не оформлен, содержит слизь, нередко в большом количестве, в нем много лейкоцитов, клеток кишечного эпителия.

Дискинетический синдром характеризуется фрагментами кала, окутанными слизью.

Синдром недостаточности всасывания (синдром мальабсорбции) - клинический симптомокомплекс, обусловленный нарушением питания организма вследствие расстройств процессов абсорбции в тонкой кишке. Чаще развивается при патологии тонкой кишки, в том числе и при дисбактериозе. Кроме того, синдром может быть связан с нарушением гидролиза пищевых веществ в результате снижения продукции пищеварительных ферментов в желудке и поджелудочной железе с уменьшением всасывательной поверхности кишки при ее резекции, лимфогранулематозе и других патологических процессах в ней. Синдром мальабсорбции характеризуется расстройством обмена веществ - жирового, углеводного, белкового, водно-солевого, а также нарушением обмена витаминов.

Как правило, устанавливают диагноз дисбактериоз на основе клинической картины развития заболевания. Основными клиническими проявлениями заболевания, которые общие, как и для взрослых, так и детей, являются:

• нарушение общего самочувствия (обезвоживание, интоксикация);
• снижение веса;
• симптомы поражения слизистых желудочно-кишечного тракта;
• нарушение процессов пищеварения в любом из отделов ЖКТ.

Однако для того чтобы был установлен точный диагноз необходима лабораторная диагностика дисбактериоза.

Современные методы диагностики дисбактериоза

В современной медицине существует множество методов диагностики нарушения микрофлоры кишечника. Разделяют два типа диагностики дисбаланса флоры: прямые и косвенные.

Прямые способы диагностики дисбактериоза

Сегодня самым распространенным лабораторным методом исследования выступает бактериологический анализ кала на дисбактериоз (посев). Однако общую картину состояния пациента данный анализ не дает, так как он показывает лишь состояние тех микробов, что расположены в толстой кишке, а точнее в его конечно отделе. К сожалению, о состоянии микрофлоры тонкого кишечника данный анализ рассказать абсолютно не сможет.

Более того, бактериологическая диагностика дисбактериоза кишечника представляет заключение минимум 14, а максимум 25 видов бактерий, несмотря на то, что в кишечнике обитает их более четырех сотен.

Получение достоверных результатов посева на дисбактериоз возможно лишь при условии полной стерильности, правильной транспортировке материала (соблюдение необходимого температурного режима), а также проведение анализа фекалий спустя не более трех часов после их забора. К огромному сожалению, в наши дни такими условиями могут располагать лишь единицы лабораторий и именно по этой причине, как правило, получаемые результаты анализов уже искажены.

Однако, несмотря на это данный метод диагностики дисбактериоза имеет явное преимущество. В сравнении с другими видами анализов, проводимых при установлении дисбаланса кишечника, он самый дешевый и при его помощи можно определить количество и вид микробов. Правда, длительность проведения составляет одну неделю.

О состоянии флоры тонкого кишечника можно получить информацию после посева биоптата стенок кишечника либо аспирата , который содержится в нем. Правда, данные исследования довольно сложные с технической стороны и их проводят исключительно в крайних случаях.

В последние годы все больше используют ПЦР-диагностику дисбактериоза (полимеразная цепная реакция). Популярен метод тем, что он весьма универсален, а именно для проведения данного исследования нет четких требований к материалу.

При исследовании кала на дисбактериоз при помощи ПЦР-диагностики в применяемом материале выделяют фрагмент ДНК либо РНК возбудителя. При этом стоит отметить, что выделенный фрагмент характерен лишь определенного возбудителя. В дальнейшем его достраивают до тех размеров, которые будут достаточны для визуальной регистрации.

Еще одной особенностью данного метода лабораторного исследования выступает его быстрота проведения. К тому же, при его помощи определяется наличие бактерии, если она даже присутствует только в одной клетке и расположена не рядом с просветом кишечника. Правда, данный анализ может быть точным при условии, что патогенные вирусы и бактерии известны. Другими словами круг исследования достаточно ограничен. В связи с этим ПЦР-диагностику проводят с целью определения проявившей себя инфекции.

Помимо прямых способов постановки диагноза «дисбактериоз кишечника» используют и косвенные. Речь идет о химических методах, во время которых собранный материал исследуют на концентрацию продуктов, выделяемых микроорганизмами в процессе своей жизнедеятельности. Вот именно на их основании и делают выводы и количестве и качестве бактерий в кишечнике. Речь идет о:

• газожидкостной хроматографии, которая помогает определить в фекалиях наличие жирных летучих кислот;
• масс-спектрометрие.

Такая диагностика дисбактериоза кишечника позволяет определить от 35 до 40 показателей. К преимуществам косвенного химического исследования баланса микрофлоры относят:

• диагностирование анаэробной инфекции, которая на открытом воздухе погибает;
• одновременное оценивание живых и мертвых организмов;
• малые концентрации клеток вирусов и бактерий независимо от их происхождения;
• короткие сроки проведения анализа, так как максимальное время его проведения составляет всего три часа.

Однако, несмотря на положительные стороны данного исследования, существуют его и отрицательные, а именно:

• для анализа различных видов бактерий требуется проведения неоднократных исследований;
• высокая цена оборудования;
• сложность исследования с технической стороны.

Еще одни, правда, не популярные методы диагностики дисбактериоза выступают дыхательные тесты , при помощи которых возможно определить наличие патогенных микроорганизмов у человека, не прибегая к забору фекалий. Исследования проводятся выдыхаемого воздуха. Однако данный метод предполагает высокую вероятность ошибки. В связи с этим проведение дыхательного исследования используется для установления предварительных результатов.

Напоследок стоит подчеркнуть, что в наши дни диагностика дисбактериоза кишечника весьма сложная процедура. Причиной тому выступает отсутствие подлинной информации о нормальном составе микрофлоры кишечника, так как его изменения возможны из-за перемен погоды и климата. На кишечный баланс также влияет и смена рациона питания. В связи с этим результатов, которые дают возможность сделать однозначный вывод, современные методы диагностики не имеют. Все лаборатории руководствуются существующими условными данными, поэтому многие анализы на дисбактериоз обнаружат наличие заболевание даже при временных отклонениях.